為了使奧林巴斯顯微鏡的視野能受到均勻而又充分的照明，在奧林巴斯顯微鏡初次安裝和調試時，就必須把照明光路系統調整好，這是正確使用奧林巴斯顯微鏡，并獲得正確、可靠結果的重要手段和基本的要求。
此外，正確掌握照明光路系統的調整，是使用奧林巴斯顯微鏡過程中更換光源燈泡后所必經的步驟，也是在日常使用過程中不時地檢驗奧林巴斯顯微鏡性能的必要手段。
奧林巴斯顯微鏡照明光路系統的調整主要有以下內容:
(1) 照明光源燈室在顯微外的初步調整
① 首先將燈室的外殼打開，壓彈簧夾子將鹵素燈泡裝入插座中，安裝時避免手指直接接觸燈泡(可用柔軟的布或紙隔住)，以免燈泡上留有指紋等臟物，影響燈泡的使用壽命。
② 把燈室擺在桌面上，接通電源后，用專用的螺絲刀調節燈的調焦旋鈕孔(標有"←→")，使燈絲投影在1-2m外的墻上，將燈絲成像調至清晰；然后調節燈的高低位置調節絲孔(標有"──")，使燈絲位置高低適當；再調節燈的左右位置調節螺絲孔(標有"──")，使燈絲左右位置合適。
(2) 光源發光體(燈絲)在奧林巴斯顯微鏡內位置的檢驗和校正：
目的是為了把發光體的像端端正正地調入物鏡的視域范圍內，從光源的角度去確保奧林巴斯顯微鏡的視域受到充分而均勻的照明，這是調整庫勒照明系統的前提條件。需要的基本工具:對中望遠鏡購置奧林巴斯顯微鏡時已配備。
(3) 庫勒照明(Kohler)系統的正確調整：
奧林巴斯顯微鏡的正確調試，主要工作之一是照明光路系統的調整，而其中的關鍵是庫勒照明系統的調整。對于每一位使用奧林巴斯顯微鏡的人員，特別是作顯微照像的人員來說，應該對庫勒照明系統的原理及其調整步驟有一定的了解和掌握，才能充分發揮奧林巴斯顯微鏡應有的功能，拍出來的照片才能在效果上比較一致而又完善。
庫勒照明系統的原理簡單來說就是:光源發光體上任意一點發出的光，可以照明奧林巴斯顯微鏡的視域范圍，而光源發光體上每一點所發出的光匯集起來，在奧林巴斯顯微鏡的視域中就實現了非常充分而又均勻的照明。內位置的校驗，只需在奧林巴斯顯微鏡初次安裝調試及更換燈泡時進行，平時使用奧林巴斯顯微鏡時不能隨意亂調亂動。萬一調亂時，可按上述步驟調回原狀。
調整方法是用對中望遠鏡對焦于視野中黑色相差環上，調節孔徑光闌，可以看到一個多邊形的孔徑光闌像，然后調到等于物鏡孔徑像的2/3，即介于黑色相差環外與圓形視域內之間。為方便起見，可把與各倍數物鏡相對應的孔徑光闌預先調整好，并作好標記，以免每次使用都要重新調整。